Size Exclusion

尺寸排阻色谱法

尺寸排阻色谱法(SEC)是聚合物分离的主要方法。 其根据填料孔隙而分离样品分子。样品大分子不能进入或只能进入部分孔隙,而较小分子则能进入大多数或全部孔隙。

在SEC中,大分子先从柱中洗脱出来,小分子后洗脱出来,能够进入所有孔隙的最小分子最后从柱中洗脱出来。尺寸排阻色谱法是唯一不会通过溶质与固定相之间吸附作用或分配作用的色谱法。

从有机聚合物中制备而成的颗粒一直是使用范围最广的尺寸排阻色谱法(SEC)填料。术语SEC、GFC(凝胶过滤色谱法)和GPC(凝胶渗透色谱法)均指相同的色谱技术。GFC使用含水流动相,而GPC则使用有机流动相。通用术语SEC包括上述两种用途。

生物化学家喜欢采用GFC分离蛋白组分或去除生物技术生产过程中最终的聚合物。GFC还常被用于去除(蛋白质)样品溶液中的盐分,为其它色谱分离模式制备洗脱样品。

GPC在工业有机可溶聚合物的检定过程中发挥着重要作用。

 

 


TSKgel SW型色谱柱于1977年问世,现已成为凝胶过滤色谱法的标准。GFC常被用于分离蛋白组分,除去多聚体,除去蛋白质样品中的盐分,分离核酸组分。GFC还用于在食品、油漆、药物的生产领域等过程中的水溶性聚合物的分析。 
 
最新的 TSKgel SW mAb 产品线包括两种专为分离和分析单克隆抗体(mAb)而设计的色谱柱。与其他竞争产品相比,TSKgel SW mAb 硅胶基质色谱柱的批次间差异减小、使用寿命更长,非特异性吸附减少,并且对聚合物具有良好的回收率。
 
TSKgel SW, SWXL 和 SuperSW 系列色谱柱属于硅胶基质的 GFC 色谱柱,使用含水缓冲液作为流动相,用来分离蛋白质和核酸。亲水性二醇基官能团以保护硅表面不与蛋白样品相互作用。现有三种孔径尺寸。
  •  12.5 nm孔径:适用于分析小分子蛋白和多肽
  •  25 nm孔径:适用于分析大多数蛋白 
  •  45 nm孔径:适用于分析超大型蛋白和核酸
与其他竞争产品比较,SW 型色谱柱单位柱体积的孔隙容量更大,能产生更高的分子量选择性范围和更高的分辨率。TSKgel BioAssist DS 色谱柱用于在半制备规模的蛋白质或核苷酸样品的脱盐、缓冲液交换。
 
SW 型柱和 BioAssist DS 柱的粒径分别为:

请参见TSKgel SW 型和TSKgel BioAssist DS 色谱柱的产品页面以获取更多的产品信息及标准曲线。


TSKgel PW 型色谱柱特别适用于水溶性聚合物分析。所有TSKgel聚合物凝胶过滤柱均由聚甲基丙烯酸酯树脂填充。

TSKgel PW 型色谱柱具有更宽的分离范围,更好的校准曲线线性,相比较TSKgel SW 型柱吸附更少,所以是分析水溶性聚合物的绝佳选择。

尽管 TSKgel SW 型色谱柱是分析生物大分子的首选色谱柱,但对于较小的肽 (<1,000 Da)、蛋白质聚合物、DNA 片段和病毒,TSKgel PW 型色谱柱则有更好的分离效果。

  • TSKgel PW : 当分析时间充裕时,或当样品量不受限制时,使用PW 型柱收集组分,或实现最大塔板数但是这些需要较久的分析时间。
  • TSKgel PWXL : 使用柱效更高的 PWXL 型柱去实现最佳分辨率,从而缩短分析时间,或在样品量受限的情况中分析样品。
  • TSKgel PWXL-CP : 化学修饰的 PWXL-CP 柱提高了阳离子型聚合物的回收率。
  • TSKgel SuperPW : SuperMultiporePW 系列色谱柱内填充有多种孔径的微粒,适用于分析分子量范围较宽的水溶性聚合物(水溶性高分子聚合物到低聚物)。

请参见 TSKgel PW 型色谱柱的产品页面以获取更多的产品信息及标准曲线。

 

TSKgel Alpha 和 TSKgel SuperAW 色谱柱是专为中间极性聚合物的GPC分析所开发的产品。与PW和PWXL型色谱柱一样,TSKgel Alpha 和 SuperAW 色谱柱内的填料颗粒也具有羟基化甲基丙烯酸聚合物骨架,不过其交联度却高于 PW 和 PWXL 型色谱柱,从而可以将填料在极性有机溶剂中的溶胀减小到最低。

应用范围:可溶于甲醇、乙腈、DMSO、异丙醇或THF的聚合物,以及可溶于水的聚合物。

TSKgel Alpha 和 TSKgel SuperAW 色谱柱在以下各种有机溶剂中没有溶胀或溶胀最小:甲醇、乙腈、DMSO、异丙醇、THF和HFIP。在 DMF 溶剂中可以对聚苯乙烯聚合物有正常的保留并能精确测定MW。洗脱液中的盐分峰值不会干扰低聚物的洗脱出峰。

在高通量应用中使用 TSKgel SuperAW 色谱柱,在得到同样分离效果的前提下,可以比使用 TSKgel Alpha 色谱柱节省一半分析时间。

请参见TSKgel SuperAW 和 TSKgel Alpha 色谱柱的产品页面以获取更多的产品信息及标准曲线。

 

TSKgel H 系列 GPC 色谱柱适合用来分析有机可溶聚合物,填充有球形颗粒,该球形颗粒由与二乙烯基苯交联的聚苯乙烯(PS-DVB)构成。该系列产品包括 TSKgel HXL, HHR, SuperH, Super HZ, 以及 SuperMultiporeHZ 型色谱柱。每种色谱柱都具有不同的惰性程度和使用温度范围。

  • TSKgel SuperH 和 TSKgel SuperHZ 柱专为高通量分析而设计。这两种产品系列填料粒径低至3μm,长度为15cm,直径分别为6mm ID 和 4.6mm ID。
  • TSKgel HXL 和 TSKgel HHR 柱均为常规GPC分析柱,尺寸为7.8mm ID x 30cm,填料粒径为5µm,孔径更大的柱子具有更大的填料粒径。
  • 东曹创新性的多孔径技术能生产出孔径分布范围较宽的填料颗粒。如 TSKgel SuperMultiporeHZ, 无需混合孔径不同的颗粒即可制备校准曲线线性范围更宽的分析柱。

除TSKgel SuperMultiporeHZ 型色谱柱以外,所有的TSKgel H 型分析柱都可以提供至少5种以上的不同孔径产品。各个产品系列都包括用于从低聚物到分子量高达4 x 10^8Da (估计值)的高聚物的分析柱。所有的产品系列都包括将不同孔径填料混合装填制得的线性分析柱产品。

请参见 TSKgel H 型色谱柱的产品页面以获取更多的产品信息及标准曲线。